講演名 2000/5/19
凍結コンピテント細胞を用いた酵母菌の高効率なエレクトロポレーション法
須加 実, 後藤 充美, 畠山 豊正, 山口 昌樹,
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抄録(和) 本研究では, DNA取込み能力の高い凍結コンピテント酵母細胞を用いて, 高い形質転換効率が得られるエレクトロポレーション法を開発した.このコンピテント細胞の凍結は, 細胞培養と調整準備を省き, 直ちに遺伝子導入を行うことができるという利点がある.この凍結保存は, 細胞膜非透過型凍結保護剤であるソルビトールにカルシウムを添加して行った.これにより凍結前に比べて形質転換効率を4倍程度向上させることができ, 更に従来の問題点であった菌株に依存した凍結保護剤の最適濃度条件を考慮しなくても高い形質転換効率を得ることが可能となった.
抄録(英) A high efficiency transformation method of frozen competent yeast cells by electroporation has been developed. The frozen competent cells offer the advantage of freedom from the preparation of fresh culture. We found that high transformation efficiency could be obtained, when the competent cells were frozen in sorbitol solution with calcium. The transformation efficiency after cryopreserving with calcium was approximately 4-fold higher than that before freezing. Furthermore, it was no necessary to take account of the optimum concentration of cryoprotectants depending on strain to strain. This cryopreservation method for electroporation is more simple and useful.
キーワード(和) エレクトロポレーション / 凍結保存 / コンピテント細胞 / 酵母 / カルシウム
キーワード(英) Electroporation / Cryopreservation / Competent cell / Yeast / Calcium
資料番号 MBE2000-4
発行日

研究会情報
研究会 MBE
開催期間 2000/5/19(から1日開催)
開催地(和)
開催地(英)
テーマ(和)
テーマ(英)
委員長氏名(和)
委員長氏名(英)
副委員長氏名(和)
副委員長氏名(英)
幹事氏名(和)
幹事氏名(英)
幹事補佐氏名(和)
幹事補佐氏名(英)

講演論文情報詳細
申込み研究会 ME and Bio Cybernetics (MBE)
本文の言語 JPN
タイトル(和) 凍結コンピテント細胞を用いた酵母菌の高効率なエレクトロポレーション法
サブタイトル(和)
タイトル(英) High efficiency electroporation of yeast with frozen competent cells
サブタイトル(和)
キーワード(1)(和/英) エレクトロポレーション / Electroporation
キーワード(2)(和/英) 凍結保存 / Cryopreservation
キーワード(3)(和/英) コンピテント細胞 / Competent cell
キーワード(4)(和/英) 酵母 / Yeast
キーワード(5)(和/英) カルシウム / Calcium
第 1 著者 氏名(和/英) 須加 実 / Minoru Suga
第 1 著者 所属(和/英) 富山大学 工学部
Faculty of Engineering, Toyama University
第 2 著者 氏名(和/英) 後藤 充美 / Atsumi Goto
第 2 著者 所属(和/英) 富山大学 工学部
Faculty of Engineering, Toyama University
第 3 著者 氏名(和/英) 畠山 豊正 / Toyomasa Hatakeyama
第 3 著者 所属(和/英) 富山大学 工学部
Faculty of Engineering, Toyama University
第 4 著者 氏名(和/英) 山口 昌樹 / Masaki Yamaguchi
第 4 著者 所属(和/英) 富山大学 工学部
Faculty of Engineering, Toyama University
発表年月日 2000/5/19
資料番号 MBE2000-4
巻番号(vol) vol.100
号番号(no) 98
ページ範囲 pp.-
ページ数 5
発行日